LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA ORGANIK II PERCOBAAN 8 “Isolasi Senyawa Bahan Alam (Steroid dan Terpenoid)”

  LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA ORGANIK II

PERCOBAAN  8

“Isolasi Senyawa Bahan Alam (Steroid dan Terpenoid)”

 

 

DUSUSUN OLEH :

WISLIANA

(A1C118060)

DOSEN PENGAMPU :
Dr.Drs. SYAMSULRIZAL . M,Si

               
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIA
JURUSAN PENDIDIKAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN
UNIVERSITAS JAMBI
2020

VII. Data Pengamatan

No	Perlakuan	Tujuan Pengamatan	Hasil Pengamatan
1.	Ditimbang 20 gr alga merah dan dimasukkan ke dalam Erlenmeyer + 100mL methanol dan dimaserasi selama 24 jam	Untuk memulai menunjukkan senyawa steroid	Ekstrak etanol larut dalam metano Larutan berwarna hijau pekat
2.	Dikumpulkan filtrate dalam labu alas bulat dan Ekstrak methanol dipekatkan dengan alat rotary vaporator evaporator dilakukan pada suhu 35oC .	Untuk memusatkan hasil maserasi dilakukan rotary evaporator sehingga pelarut methanol dapat menguap dengan epat di bawah titik didihnya dari 20 gram Tujuan rotary evaporator Untuk memisahkan pelarut dngan ekstrak alga merah	Larutan berwarna hijau bening
3.	Dihidrolisis dengan menambahkan 10mL HCl 2 M dan distirer selama 1 jam	untuk memutus ikatan glikosida glycans dan ugly cones	Larutan hujau keruh
4.	Hasil hidrolisis yang diperoleh ditambahkan natrium bikarbonat (NaHCO3) hingga pH netral	Untuk menghentikan reaksi hidrolisis	Larutan mengental dan memadat hijau pekat
5.	Dilakukan ekstraksi cair-cair yaitu partisi dengan 10 mL N-heksan.Selanjutnya ekstrak ditambahkan 10 mL etil asetat dan 10 mL kloroform kemudian diekstraksi	Partisi separasi untuk memisahkan senyawa steroid nonpolar dari senyawa polar lain	Larutan terbagi menjadi dua Atas : bening putih Bawah : kuning dan bercampur oren gelap Sebagiankecil 0,3 untuk 6 gram didapat dengan rendemen 78,13%
6.	Ekstrak 1mg dengan reagen birch Lieberman (setengah mL asam asetat anhidrat dan 1-2 mL H2SO4 pekat	Untuk menunjukkan adanya senyawa steroid dan tipenoid	Hasil positif pada seroid mucul Warna hijau. Tes disini positif pada tripid enoyed yang ditunjukkan dengan warna merah bata

 

VIII. Pembahasan

Ekstraksi sampel alga merah (Eucheuma cottonii) menggunakan metode maserasi dengan pelarut metanol. Maserasi dilakukan dengan cara merendam  serbuk sampel dalam pelarut. Pelarut akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat aktif sehingga zat aktif akan larut. Adanya perbedaan konsentrasi larutan zat aktif di dalam sel, menyebabkan larutan yang terpekat didesak keluar.

Metode maserasi dipilih agar senyawa yang terkandung dalam sampel tidak rusak akibat pemanasan. Maserasi pada percobaan ini menggunakan pelarut methanol. Metabolit primer dan metabolit sekunder lebih banyak dan lebih beragam ketika maserasi menggunakan pelarut metanol karena penetrasinya ke dalam dinding sel lebih efisien.

Prinsip utama dalam maserasi adalah mengekstrak senyawa aktif yang dapat larut dalam pelarut berdasarkan tingkat kepolaran masing-masing pelarutnya atau dikenal dengan istilah like dissolves like. Perendaman dilakukan selama 24 jam dan dikocok menggunakan shaker.  Pengocokan sampel berfungsi untuk mempercepat kontak antara sampel dengan  pelarut agar ekstraksi lebih maksimal. Maserat yang telah homogen disaring menggunakan corong Buchner untuk memisahkan filtrat dan residunya. Filtrat yang telah diperoleh dipekatkan menggunakan vacuum rotary evaporator, proses pemekatan dihentikan saat pelarut sudah tidak menetes lagi pada labu alas bulat.

Pada percobaan ini diawali dengan ditimbang 20 gr alga merah dan dimasukkan ke dalam Erlenmeyer + 100mL methanol dan dimaserasi selama 24 jam untuk memulai menunjukkan senyawa steroid dan terpenoid. Hasil pengamatannya ialah ekstrak etanol larut dalam methanol dan larutan berwarna hijau pekat. Selanjutnya Dikumpulkan filtrate dalam labu alas bulat dan Ekstrak methanol dipekatkan dengan alat rotary vaporator evaporator dilakukan pada suhu 35^oC Untuk memusatkan hasil maserasi dilakukan rotary evaporator sehingga pelarut methanol dapat menguap dengan epat di bawah titik didihnya dari 20 gram. Tujuan rotary evaporator untuk memisahkan pelarut dngan ekstrak alga merah. Hasil pengamatannya Larutan berwarna hijau bening. Selanjutnya Dihidrolisis dengan menambahkan 10mL HCl 2 M dan distirer selama 1 jam untuk memutus ikatan glikosida glycans dan ugly cones, larutan hujau keruh. Hasil hidrolisis yang diperoleh ditambahkan natrium bikarbonat (NaHCO₃) hingga pH netral Untuk menghentikan reaksi hidrolisis, Larutan mengental dan memadat hijau pekat. Ekstrak pekat dihidrolisis dengan 10 mL HCl 2 N selama 1 jam. Hal ini dilakukan untuk memisahkan senyawa metabolit sekunder yang umumnya dalam bentuk glikosida menjadi glikon dan aglikonnya senyawa yang terikat dengan glikosida dapat dihidrolisis menggunakan asam kuat HCl 2 N. Reaksi pemutusan ikatan glikosida dapat disajikan dalam gambar di bawah ini:

 

Larutan selanjutnya dinetralkan menggunakan natrium bikarbonat untuk mentralkan pH. Reaksi netralisasi ditunjukkan :

2HCl + NaHCO₃ 2NaCl + H₂O + CO₂

Dilakukan ekstraksi cair-cair yaitu partisi dengan 10 mL N-heksan.Selanjutnya ekstrak ditambahkan 10 mL etil asetat dan 10 mL kloroform kemudian diekstraksi. Partisi separasi untuk memisahkan senyawa steroid nonpolar dari senyawa polar lain, Ekstrak pekat yang telah dihidrolisis, kemudian diekstraksi cair-cair menggunakan corong pisah dengan pelarut etil asetat untuk memisahkan senyawa senyawa semi polar yang kemungkinan larut dalam pelarut polar, pelarut ini dipilih karena alga merah (Eucheuma cottonii) teridentifikasi kandungan triterpenoidnya ketika menggunakan pelarut etil asetat. Pada saat pencampuran antara ekstrak metanol dengan etil aseat terjadi perubahan distribusi ekstrak, yaitu ekstrak meninggalkan pelarut yang pertama (metanol) dan masuk ke dalam pelarut kedua (etil asetat). Larutan terbagi menjadi dua. Atas : bening putih, Bawah : kuning dan bercampur oren gelap. Ekstrak 1mg dengan reagen birch Lieberman (setengah mL asam asetat anhidrat dan 1-2 mL H2SO₄ pekat. Untuk menunjukkan adanya senyawa steroid dan tipenoid, Hasil positif pada seroid mucul Warna hijau. Tes disini positif pada tripid enoyed yang ditunjukkan dengan warna merah bata.

IX. Pertanyaan Pascapraktek

1. Ekstrak pekat dihidrolisis dengan 10 mL HCl 2 N selama 1 jam. Apa yang terjadi jika ekstrak pekat dihidrolisis dengan 10 mL HCl 2 N selama 2 jam?

2. Pada saat pencampuran antara ekstrak metanol dengan etil aseat terjadi perubahan distribusi ekstrak. Mengapa demikian?

3. Mengapa pada isolasi disini menggunakan metode maserasi dan mengapa menggunakan metanol sebagai pelarutnya?

X. Kesimpulan       

1. Ekstraksi sampel alga merah (Eucheuma cottonii) menggunakan metode maserasi dengan pelarut metanol. Maserasi dilakukan dengan cara merendam serbuk sampel dalam pelarut.

2. Steroid adalah senyawa organik lemak sterol tidak terhidrolisis yang didapat dari hasil reaksi penurunan dari terpena atau skualena.

XI. Daftar Pustaka

Bhawani, S.A., Sulaiman, O.,Hashim,R., dan Ibrahim, M.N.M., 2011,Thinlayer chromatographic analysis of steroids., Trop J Pharm Res., 9, 301-313.

Grayson, D. H., 2000, Monoterpenoid, University Chemical Laboratory, Trinity College, Dublin 2, Ireland.

Heyne, K., 1950, Tumbuhan Berguna Indonesia, Terjemahan Badan Litbang Kehutanan, Jilid III Ed. I, 1686, Penerbit Yayasan Sarana Wanarja, Jakarta.                                                               

Kardong, D., Upadhyaya, S., dan Saikia, L.R., 2012, Screening of phytochemicals, antioxidant and antibacterial Activity of crude extract of Pteridium aquilinum Kuhn., J Pharm Res., 5(11), 5194- 5196.

Nasrudin,dkk. 2017. ISOLASI SENYAWA STEROID DARI KUKIT AKAR SENGGUGU (Clerodendrum serratum L.Moon): NJurnal Ilmiah Farmasi – UNSRAT Vol. 6 No. 3.

Samejo, M,Q., Memon, S., Bhanger, M.I., dan Khan, K. M., 2013, Isolation and characterization of steroids from Calligonum polygonoides., J. Pharmacy Res., 6, 346-349.